ВЭЖХ на оборудовании Agilent. Углубленный курс (авторский курс Гринцевича И.Б.) НОВЫЙ СЕМИНАР!

---

---

---

Курс для опытных специалистов, которые уже разобрались со всеми базовыми вопросами. Обычно на это уходит около 2-х лет работы.

Формы обучения:

• лекции;
• практические занятия на оборудовании: Agilent 1260;
• самостоятельная работа;
• демонстрационные занятия;
• тестирование знаний.

Результат:

Вы будете готовы к работе, связанной с разработкой новых методов ВЭЖХ.

Вы получите инструменты для выявления и эффективного исправления недостатков в существующих методиках анализа, а также для целенаправленного изменения вида хроматограммы.

Вы сможете диагностировать и устранять проблемы инструментального характера при работе с жидкостным хроматографом.

Вы научитесь управлять градиентными программами элюирования, подстраивая под свои пожелания времена удерживания и разрешение пиков на хроматограмме.

Вы сможете более эффективно использовать рабочее время.

Вы узнаете, как минимизировать расходы на содержание жидкостного хроматографа в лаборатории.

ПРОГРАММА ОБУЧАЮЩЕГО СЕМИНАРА

«ВЭЖХ на оборудовании Agilent. Углубленный курс»

---

1. Основные понятия и определения ВЭЖХ

Основные определения. История метода. Понятие «процесс разделения». Качественный и количественный анализ. Параметры, описывающие хроматограмму: время удерживания, неудерживаемый объем, эффективность, симметрия, разрешение.

---

2. Теория ВЭЖХ

Тема 2.1. Процесс разделения. Способы управления разрешением
Обзор факторов, влияющих на разрешение: селективность, ёмкость, эффективность.
Инструменты для достижения необходимого разделения: свойства неподвижной фазы; геометрические параметры колонки (длина, диаметр, размер частиц сорбента); состав подвижной фазы; элюирующая сила; температура колонки; скорость потока; объём закола.
Тема 2.2. Размытие хроматографических пиков
Факторы размытия хроматографических пиков в жидкостной хроматографии: вихревая диффузия; молекулярная диффузия, сопротивление массопередаче. Уравнение Ван-Деемтера. Подходы к уменьшению размытия хроматографических пиков: геометрические характеристики и температура хроматографической колонки, природа органического растворителя, скорость потока подвижной фазы. Давление и его зависимость от разных факторов. Размытие пиков: внеколоночный объём, паразитный мертвый объем.
Тема 2.3. Изократическое и градиентное элюирование
Изократический и градиентный режим элюирования: достоинства и недостатки. Предпочтительные случаи применения для каждого режима элюирования.
Виды градиентных программ. Способы пересчета градиентных профилей при: изменении геометрии колонки, изменении состава элюентов. Требования к чистоте реактивов в градиенте.

---

3. Аппаратное оформление ВЭЖХ

Тема 3.1. Основные блоки хроматографа – особенности и расширенные настройки, не указываемые в методах анализа
Два основных типа насосов – четвертичный градиентный насос со смешением элюентов на стороне низкого давления и бинарный насос со смешением на стороне высокого давления – различия в конструкции и особенности эксплуатации. Дополнительные настройки насоса: настройка сжимаемости элюентов, плавное включение / выключение потока.
Автоматическое устройство ввода проб (автосамплер) – дозирование с помощью дозирующего устройства (конструкция Agilent Technologies) и дозирование с помощью петли (конструкция Thermo, Shimadzu, Waters, Hanon) – достоинства и недостатки, особенности эксплуатации и обслуживания. Дополнительные возможности автосамплеров Agilent: промывка иглы, изменение глубины погружения иглы в виалу, изменения скорости отбора раствора, создание программы предколоночной дериватизации, ускорение цикла отбора пробы.
Термостат колонок: твердотельный или сухо-воздушный. Дополнительные возможности термостата: кран-переключатель колонок для увеличения производительности вашего хроматографа, автоматизированное определение колонок и учет их использования.
Тема 3.2. Детектирование в ВЭЖХ, виды детекторов
Типы и свойства детекторов в ВЭЖХ. Закон Бугера-Ламберта-Бера.
Спектрофотометрический (VWD) и диодно-матричный (DAD): принцип устройства и основные аспекты оперирования. Критичные настройки, способные повлиять на результат анализа, не указанные в тексте методик. Разбор понятий: «хромофоры», «селективность длины волны», «характеристичность спектра». Запись и работа со спектрами.
Флуоресцентный детектор и рефрактометр. Пред- и пост-колоночная дериватизация.

---

4. Работа с программным обеспечением

Тема 4.1. Работа с прибором On-line
Создание инструментального метода анализа. Анализ образцов в режиме единичного закола и в режиме рабочей последовательности. Анализ тестовых образцов в разных условиях.
Тема 4.2. Работа с программным обеспечением Off-line
Основные этапы работы оператора по анализу хроматографических данных: сравнение (наложение) хроматограмм, интегрирование, создание отчета. Обсчет серии хроматограмм. Порядок интегрирования хроматограммы. Основные подходы. Различия ручного и автоматического режимов интегрирования. Порядок создания хроматографических отчетов и представления хроматографических данных. Различные типы встроенных шаблонов отчетов.
Тема 4.3. Качественный и количественный анализ
Качественный анализ, спектральная обработка данных. Количественный анализ, калибровка. Основные подходы к количественному анализу: метод нормализации, метод внешнего стандарта (абсолютная градуировка), метод внутреннего стандарта.

---

5. Практика работы с жидкостным хроматографом

Планово-профилактические работы. Надлежащая практика работы с элюентами, выбор состава элюента для долговременного хранения прибора. Требования метода ВЭЖХ к пробоподготовке образцов, типичные промахи. Основные способы финальной очистки. Надлежащая практика обращения с хроматографическими колонками.
Поиск и устранение неисправностей. Диагностика работоспособности оборудования. Дополнительные возможности диагностики с помощью специализированного программного обеспечения «Lab Advisor». Наиболее распространенные причины неполадок прибора: примеры из жизни (case study). Определение методологических и аппаратных проблем ВЭЖХ.

---

* В ходе проведения семинара возможно внесение изменений в программу мероприятия.

тайминг обучения — пн.: 10:00 — 15:00; вт., ср., чт.: 9:00 — 17:30; пт.: 9:00 — 12:00

Полезная информация:

ПИСЬМО | АНКЕТА | ДОГОВОР