ВЭЖХ на оборудовании Agilent. Углубленный курс (авторский курс Гринцевича И.Б.)
Возможен индивидуальный онлайн-формат с датой на выбор (см. ниже)
Кандидат химических наук, Заместитель директора по развитию ООО «Кампилаб-Сервис», Преподаватель — Химфак Белорусского Государственного Университета
В соответствии с Кодексом об образовании РБ
Возможно обучение в форме Повышения квалификации с выдачей Свидетельства о повышении квалификации
Курс для опытных специалистов, которые уже разобрались со всеми базовыми вопросами. Обычно на это уходит около 2-х лет работы.
Формы обучения:
- лекции;
- практические занятия на оборудовании: Agilent 1260;
- самостоятельная работа;
- демонстрационные занятия;
- тестирование знаний.
Результат:
Вы будете готовы к работе, связанной с разработкой новых методов ВЭЖХ.
Вы получите инструменты для выявления и эффективного исправления недостатков в существующих методиках анализа, а также для целенаправленного изменения вида хроматограммы.
Вы сможете диагностировать и устранять проблемы инструментального характера при работе с жидкостным хроматографом.
Вы научитесь управлять градиентными программами элюирования, подстраивая под свои пожелания времена удерживания и разрешение пиков на хроматограмме.
Вы сможете более эффективно использовать рабочее время.
Вы узнаете, как минимизировать расходы на содержание жидкостного хроматографа в лаборатории.
- Целенаправленно управлять разрешением и видом хроматограммы, осознанно подбирая селективность, эффективность и ёмкость через неподвижную фазу, геометрию колонки, состав подвижной фазы, температуру, скорость потока и объём пробы.
- Разрабатывать и оптимизировать собственные методики ВЭЖХ, а также находить и исправлять недостатки в уже действующих методах анализа.
- Управлять градиентными программами элюирования — подстраивать времена удерживания и разрешение пиков и корректно пересчитывать градиент при смене геометрии колонки или состава элюентов.
- Снижать размытие хроматографических пиков, понимая вклад вихревой и молекулярной диффузии, массопередачи и внеколоночных (паразитных) объёмов (уравнение Ван-Деемтера).
- Использовать расширенные настройки хроматографа, не указанные в методиках: режимы насосов (бинарный / четвертичный), сжимаемость элюентов, тонкие настройки автосамплера и термостата (включая кран-переключатель колонок).
- Осознанно выбирать и настраивать детекторы (VWD, диодно-матричный, флуоресцентный, рефрактометр), работать со спектрами и контролировать критичные параметры детектирования, влияющие на результат.
- Диагностировать и устранять инструментальные и методологические неполадки хроматографа, в том числе с помощью ПО «Lab Advisor», и проводить планово-профилактическое обслуживание.
- Минимизировать расходы на содержание жидкостного хроматографа и эффективнее организовывать рабочее время лаборатории.
1. Основные понятия и определения ВЭЖХ
Основные определения. История метода. Понятие «процесс разделения». Качественный и количественный анализ. Параметры, описывающие хроматограмму: время удерживания, неудерживаемый объем, эффективность, симметрия, разрешение.
2. Теория ВЭЖХ
Тема 2.1. Процесс разделения. Способы управления разрешением
Обзор факторов, влияющих на разрешение: селективность, ёмкость, эффективность.
Инструменты для достижения необходимого разделения: свойства неподвижной фазы; геометрические параметры колонки (длина, диаметр, размер частиц сорбента); состав подвижной фазы; элюирующая сила; температура колонки; скорость потока; объём закола.
Тема 2.2. Размытие хроматографических пиков
Факторы размытия хроматографических пиков в жидкостной хроматографии: вихревая диффузия; молекулярная диффузия, сопротивление массопередаче. Уравнение Ван-Деемтера. Подходы к уменьшению размытия хроматографических пиков: геометрические характеристики и температура хроматографической колонки, природа органического растворителя, скорость потока подвижной фазы. Давление и его зависимость от разных факторов. Размытие пиков: внеколоночный объём, паразитный мертвый объем.
Тема 2.3. Изократическое и градиентное элюирование
Изократический и градиентный режим элюирования: достоинства и недостатки. Предпочтительные случаи применения для каждого режима элюирования.
Виды градиентных программ. Способы пересчета градиентных профилей при: изменении геометрии колонки, изменении состава элюентов. Требования к чистоте реактивов в градиенте.
3. Аппаратное оформление ВЭЖХ
Тема 3.1. Основные блоки хроматографа – особенности и расширенные настройки, не указываемые в методах анализа
Два основных типа насосов – четвертичный градиентный насос со смешением элюентов на стороне низкого давления и бинарный насос со смешением на стороне высокого давления – различия в конструкции и особенности эксплуатации. Дополнительные настройки насоса: настройка сжимаемости элюентов, плавное включение / выключение потока.
Автоматическое устройство ввода проб (автосамплер) – дозирование с помощью дозирующего устройства (конструкция Agilent Technologies) и дозирование с помощью петли (конструкция Thermo, Shimadzu, Waters, Hanon) – достоинства и недостатки, особенности эксплуатации и обслуживания. Дополнительные возможности автосамплеров Agilent: промывка иглы, изменение глубины погружения иглы в виалу, изменения скорости отбора раствора, создание программы предколоночной дериватизации, ускорение цикла отбора пробы.
Термостат колонок: твердотельный или сухо-воздушный. Дополнительные возможности термостата: кран-переключатель колонок для увеличения производительности вашего хроматографа, автоматизированное определение колонок и учет их использования.
Тема 3.2. Детектирование в ВЭЖХ, виды детекторов
Типы и свойства детекторов в ВЭЖХ. Закон Бугера-Ламберта-Бера.
Спектрофотометрический (VWD) и диодно-матричный (DAD): принцип устройства и основные аспекты оперирования. Критичные настройки, способные повлиять на результат анализа, не указанные в тексте методик. Разбор понятий: «хромофоры», «селективность длины волны», «характеристичность спектра». Запись и работа со спектрами.
Флуоресцентный детектор и рефрактометр. Пред- и пост-колоночная дериватизация.
4. Работа с программным обеспечением
Тема 4.1. Работа с прибором On-line
Создание инструментального метода анализа. Анализ образцов в режиме единичного закола и в режиме рабочей последовательности. Анализ тестовых образцов в разных условиях.
Тема 4.2. Работа с программным обеспечением Off-line
Основные этапы работы оператора по анализу хроматографических данных: сравнение (наложение) хроматограмм, интегрирование, создание отчета. Обсчет серии хроматограмм. Порядок интегрирования хроматограммы. Основные подходы. Различия ручного и автоматического режимов интегрирования. Порядок создания хроматографических отчетов и представления хроматографических данных. Различные типы встроенных шаблонов отчетов.
Тема 4.3. Качественный и количественный анализ
Качественный анализ, спектральная обработка данных. Количественный анализ, калибровка. Основные подходы к количественному анализу: метод нормализации, метод внешнего стандарта (абсолютная градуировка), метод внутреннего стандарта.
5. Практика работы с жидкостным хроматографом
Планово-профилактические работы. Надлежащая практика работы с элюентами, выбор состава элюента для долговременного хранения прибора. Требования метода ВЭЖХ к пробоподготовке образцов, типичные промахи. Основные способы финальной очистки. Надлежащая практика обращения с хроматографическими колонками.
Поиск и устранение неисправностей. Диагностика работоспособности оборудования. Дополнительные возможности диагностики с помощью специализированного программного обеспечения «Lab Advisor». Наиболее распространенные причины неполадок прибора: примеры из жизни (case study). Определение методологических и аппаратных проблем ВЭЖХ.
- Полная программа курса — 5 разделов: от основ ВЭЖХ до практического обслуживания.
- Лекции и демонстрационные занятия.
- Практические занятия на оборудовании Agilent.
- Самостоятельная работа на хроматографе.
- Итоговое тестирование знаний.
- Сертификат об обучении гос. образца.
- Полная программа курса — 5 разделов в онлайн формате с доступом на 1 месяц.
- Даты проведения подбираются индивидуально для вас.
- Персональная консультация (онлайн или офлайн) с Автором курса (2 ак. часа) в согласованное время, где сможете уточнить все интересующие вопросы.
- Итоговое тестирование знаний.
- Сертификат об обучении гос. образца.
- Закрытый семинар только для ваших сотрудников.
- Дату согласуем под вас.
- Адаптация программы обучения под задачи вашей лаборатории.
- Сертификаты об обучении гос. образца для всех участников.
Оставить заявку на участие
Заполните поля и отправьте заявку — подготовим договор на организацию или примем оплату картой. После отправки в течение рабочего дня свяжемся и подтвердим запись.
Подпишитесь — сообщим о новых наборах и семинарах для специалистов лабораторий.
Анонсы наборов, изменения в законодательстве и разборы актуальных тем